在毒理試驗中,常常收集4h、24小時或某特定時間內(nèi)的尿液。通過采尿進行尿常規(guī)檢查、樣品尿中代謝濃度的測定等。為此常用代謝籠配上糞尿分離漏斗收集尿液,此裝置除支架外均用玻璃或有機玻璃制成,便于清洗。該裝置主要包括圓形有機玻璃籠罩,帶孔的圓玻璃底盤,供飲水和食料的裝置,錐形集尿漏斗和糞尿分離器等。動物置于代謝籠內(nèi),糞尿分離漏斗的側(cè)口接一只150~200ml的集尿容器收集尿液。一般5~6小時內(nèi),平均每只小鼠可收集到0.4~0.5ml的尿液。
1 可采尿情況
1.1 按照試驗方案中規(guī)定的方法、頻度以及時間進行采尿。SD或獸醫(yī)根據(jù)試驗判斷有必要進行尿檢查的場合時,可以臨時采尿。
1.2 對試驗大、小鼠的采尿,利用動物代謝籠進行。
1.3 檢查用尿以4 h之內(nèi)收集的尿或24 h收集的尿進行。
1.4 如果試驗方案中規(guī)定了尿檢查的項目,就按照試驗方案中的規(guī)定的項目進行檢查。尿檢查一般項目包括:濁度、顏色、尿膽素原、隱血、膽紅素、酮體、葡萄糖、蛋白質(zhì)、PH、亞硝酸鹽,尿沉渣(通常新鮮尿)、尿中電解質(zhì)等。
1.5 在試驗開始前由SD或獸醫(yī)以試驗方案的形式向病理臨檢部門提出檢查要求。
1.6 在試驗方案中沒有要求進行尿測定,但是SD或獸醫(yī)根據(jù)試驗判斷有必要進行尿測定的情況下,同尿臨檢檢查負責人協(xié)商,并對試驗方案進行修變更。
2 采尿程序
2.1 按照試驗方案對采尿的動物數(shù)、動物號、采尿時間(新鮮尿、24 h尿)等進行確認。
2.2 提前將動物代謝籠洗干凈并消毒后運進動物飼養(yǎng)室,將飲水瓶、飼料盒、尿收集瓶(管)等都準備好,可根據(jù)收集時間的長短決定是否需要在尿收集過程中給動物禁食或供給飼料。一般的,短時間(如4~8 h)的尿收集可以給動物禁食,但不禁水。
2.3 按照試驗方案中規(guī)定的時間將標記標簽(記錄試驗編號、動物號等)的集尿瓶接于動物代謝籠的嘴端,固定。
2.4 如果收集尿液時發(fā)現(xiàn)有必要再次采集,按再次采集(4項)操作。
3 采尿的記錄
在尿采集記錄表格上記載采集的尿量、濁度、顏色等,記錄采集時間,并署名。
4 再次采集
4.1 為了進行尿檢查,出現(xiàn)以下情況時需進行再一次收集尿:
4.1.1 尿量異常的多,懷疑時由于飲水瓶漏水所致。
4.1.2 尿中有嘔吐物、下痢便、血便等異物混入,或者有其它懷疑的情況。但是,由于給藥造成的頻繁嘔吐、流涎等,此種不可避免有異物混入的情況下,記錄主要情況,沒有必要再次采尿。
4.1.3 需要新鮮尿進行檢查,而當日沒有收集到新鮮尿的場合。
4.1.4 進行尿檢查,由于操作上的失誤或者有困難不能完成測定的場合。
4.1.5 經(jīng)臨檢承擔者,專題負責人或獸醫(yī)判斷有必要確認試驗再現(xiàn)性時。
4.2 對于前邊4.1.1~4.1.4項情況下,應(yīng)盡可能早地開始再次采尿。
4.3 對于4.1.5的場合時,再次采尿判斷者,檢驗承擔者以及采尿承擔者聯(lián)絡(luò)后,確認實驗動物號,再次采尿的時間、日期,在試驗方案記載允許的時間內(nèi)完成。
4.4尿檢查的記錄表格、用于檢查的新鮮尿、尿量、電解質(zhì)測定等數(shù)據(jù)很多,因此再次測定的理由、數(shù)值的采用、以及不采用的理由、年月日等以及判斷者均進行署名記錄,在再采尿的記錄表格上進行記錄,對于每一個數(shù)值的采用或者不采用分別記錄。
5 收集尿液的注意點
5.1 尿液收集器必須保證糞尿分開,防止糞便污染尿液。標本容器務(wù)須潔凈,其容量視動物而定。
5.2 標本收集后,須在新鮮時進行檢驗,若需放置時間較久,則須貯放在冰箱或加入適當?shù)姆栏瘎?/div>
5.3 分析尿中金屬離子時,代謝籠等應(yīng)避免用金屬材料制成,集尿容器最好用聚乙烯材料的。
5.4 為了滿足實驗所需尿量,在收集尿液前,可灌喂適量的水及青菜。
6 尿檢查
尿常規(guī)檢查項目一般包括:濁度、顏色、尿膽素原、隱血、膽紅素、酮體、葡萄糖、蛋白質(zhì)、PH、亞硝酸鹽,尿沉渣(通常新鮮尿)、尿中電解質(zhì)等。
6.1 尿常規(guī)檢查的準備
6.1.1 新鮮尿的場合(4 h尿)
6.1.1.1 尿量至少要達到1.0 ml。但4 h收集的尿量未能達到,又想得到尿時,重新收集4 h新鮮尿,如果10 h仍然未收集到足夠尿的話,則第二天重新收集。
6.1.1.2 把采集得到的尿,1500 rpm離心5 min。離心后,把上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管,標上動物號碼,作為常規(guī)檢查試驗用。沉渣部分作為尿沉渣檢查用。
6.1.2 24 h尿
6.1.2.1 把收集到尿充分混合后,裝入已經(jīng)滅菌的標有動物號碼的塑料試管中(通常為10 ml的離心管),并且在記錄表格上記錄采尿量、色度、濁度等。
6.1.2.2 把采集得到的尿,1500 rpm離心5 min。離心后,把上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管,標上動物號碼,作為試驗用標本。
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