作者：常光東 林文濤 董少華，晉城市人民醫(yī)院檢驗科
尿常規(guī)檢測是檢驗科三大常規(guī)之一，在臨床上應用廣泛，對于泌尿系統(tǒng)疾病的診斷、鑒別診斷及預后判斷有較大意義[1]。經(jīng)典的尿常規(guī)檢測需要離心取沉淀充池再用顯微鏡鏡檢，費時費力，不適合大批量檢測。隨著檢驗醫(yī)學的迅猛發(fā)展，各類型的尿液干化學、尿液有形成分分析儀及尿液分析流水線接踵而至，自動化儀器的出現(xiàn)，大大縮短了尿液檢測的時間，成為各大醫(yī)院尿液批量檢測的首選。但無論哪家的尿液分析儀，均無法代替顯微鏡鏡檢這個“金標準”[2]。根據(jù)CNAS-CL41的要求，使用自動化儀器做有形成分篩查假陰性應小于5%[3-4]，既要保障大量的結果要快速發(fā)出，又要保證結果的質量，使用尿干化學分析+尿沉渣分析+顯微鏡復檢顯然成為更合理的組合。
我科室共有三臺尿液分析儀：SYSMEX UF1000i尿液有形成分分析儀、愛威AVE-766尿液有形成分分析儀、迪瑞FUS2000尿液分析儀，三臺儀器原理各不相同，如何制定有效的復檢規(guī)則？
首先，我們從原理著手：
1.三臺儀器的檢測原理
AVE-766是由取樣臂配合進樣泵將一定量的待檢樣品和染色液吸入混勻池中充分混勻后依次注入到各通道流動計數(shù)池中，通過顯微鏡對流動計數(shù)池中有形成分的顯微鏡放大，由主機控制攝像同步裝置對分布在視域內的樣品攝取多幅圖像進行分析處理，使用低倍鏡對目標進行定位，高倍鏡進行跟蹤識別[5]，本質上是將顯微鏡鏡檢儀器化、自動化了如圖1。
圖1 AVE-766 內部結構
FUS2000尿液有形成分檢測是基于流動式顯微成像作為原理。儀器的流體力學系統(tǒng)由特別制作的具有薄層結構的流動池構成，工作站采樣后，樣本進入流動池，同時注射泵推動鞘液進入流動池，使樣本在鞘液的包裹下進入流動池的薄層結構[6]。樣本液體在鞘液的作用下以單層細胞的厚度在流動池的薄層結構處流過，然后被高速拍攝成像（如圖2）。
圖2 FUS2000原理圖
UF1000i使用流式細胞計數(shù)法技術來獲得尿細胞前向散射光及前向熒光的強度參數(shù)[7]。在對細胞中的特定物質進行熒光染色并調節(jié)到懸浮狀后，使用鞘液包圍此物質然后通過噴嘴以單柱形式噴出。此時每個尿細胞都將暴露在高度密集的激光束照射之下。單個細胞會按不同角度發(fā)出熒光和散射光。系統(tǒng)將對這些電信號進行分析，為各尿細胞按照熒光強度生成一維直方圖，并按照熒光強度和散射光強度生成二維散點圖，以便各個尿細胞進行識別（如圖3）。
圖3 UF1000i檢測原理
2.三臺儀器檢測數(shù)據(jù)對比分析
三臺儀器的原理都了解了，我們又對比了三臺儀器與顯微鏡鏡檢的符合率，如圖：
圖4
圖5
從圖4中可以看出，三臺尿液分析儀對紅細胞（RBC）檢測的符合率以UF1000i最高，達93%，其次是FUS2000（90%），AVE-766最差（87%）。圖5是三臺尿液分析儀對白細胞（WBC）檢測的數(shù)據(jù)，以UF1000i符合率最高，達92%，其次是AVE-766（89%），F(xiàn)US2000最差（85%）。而針對管型（CAST）的檢測，AVE-766符合率較好，達97%；UF1000i符合率只有81%，其中尤以假陽性率較為突出，高達18%；FUS2000系統(tǒng)自動識別功能下符合率差，僅有83%，又以假陽性率為主，但經(jīng)人工審核后假陽性率有明顯下降，從17%下降到2%，人工審核后的管型符合率高達98%，數(shù)據(jù)最好（見圖6）。
圖6
3.顯微鏡復檢規(guī)則制定原則
通常顯微鏡復檢規(guī)則的制定遵循以下原則：（1）利用交叉互驗建立復檢規(guī)則，當尿液有形成分分析儀檢測的RBC、WBC與干化學檢測的潛血（BLO）、酯酶（LEU）結果出現(xiàn)陽性與陰性差異時作為需要鏡檢的規(guī)則；（2）由于干化學檢測的蛋白（PRO）和有形成分分析儀檢測的管型之間沒有必然的聯(lián)系，因此沒有對這兩項進行交叉互檢，僅作參考根據(jù)實際情況綜合分析。（3）干化學檢測的亞硝酸鹽（NIT）與尿液有形成分分析儀檢測的細菌（BACT）之間也沒有必然的聯(lián)系，因此也沒有對這兩項進行交叉互檢，需根據(jù)實際情況綜合分析。
4.復檢規(guī)則的制定
根據(jù)三臺儀器不同的檢測原理、檢測數(shù)據(jù)分析，綜合考慮我們認為應該制定不同的復檢規(guī)則，復檢規(guī)則見下表：
表1：三臺儀器的復檢規(guī)則
AVE-766尿液有形成分檢測本質是將顯微鏡鏡檢儀器化、自動化了，所以當出現(xiàn)干化學檢測與有形成分不符的情況（AVE-766個性復檢規(guī)則1-4）時，我們建議先查看儀器所拍攝的圖片，如遇到疑問或圖片不清晰等情況再鏡檢；由于該檢測系統(tǒng)尿液有形成分無法檢出細菌，所以我們設置了AVE-766個性復檢規(guī)則5，當出現(xiàn)NIT陽性時，建議使用其他系統(tǒng)檢測。FUS2000尿液有形成分檢測是基于流動式顯微成像作為原理，所以當出現(xiàn)干化學檢測與有形成分不符的情況（FUS2000個性復檢規(guī)則1-4）時，我們也建議先查看儀器所拍攝的圖片，如遇到疑問或圖片不清晰等情況再鏡檢；由于FUS2000在管型檢測的自動識別功能上存在較大的假陽性，所以我們設置了FUS2000個性復檢規(guī)則5，當FUS2000尿液有形成分檢測到管型時，人工復審將會排除掉大部分的假陽性患者。
UF1000i在RBC、WBC檢測中的符合率分別為93%、92%，假陰性率分別為0和5%，已經(jīng)達到了CNAS-CL41對自動化儀器做有形成分篩查假陰性的要求，所以在交叉互驗方面我們僅設置了BLO-RBC+、LEU+WBC-兩種復檢規(guī)則（UF1000i個性復檢規(guī)則1-2）；但UF1000i對管型檢測的假陽性率較高，所以將管型陽性設置為復檢規(guī)則，觸發(fā)時直接顯微鏡鏡檢。
5.總結
經(jīng)過這次復檢規(guī)則的制定，我們認為由于不同的檢測儀器使用的是不同的分析原理，各分析系統(tǒng)應根據(jù)實際情況設置不同的復檢規(guī)則，相信隨著檢驗醫(yī)學的長足進步，未來一定會出現(xiàn)更多更全面的既能保證速度，又能保障質量的分析系統(tǒng)，這需要我們這一代檢驗人共同努力，共勉！
參考文獻:
[1] 徐衛(wèi)益，陳保德，許青，等 尿液自動化分析顯微鏡復檢規(guī)則的建立及應用［J］.國際檢驗與醫(yī)學,2013,34(12):1589-1590.
[2] 尚紅,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2015.
[3]中國合格評定國家認可委員會.CNAS-CL41醫(yī)學實驗室質量管理和能力認可準則在體液學檢驗領域的應用說明[S].北京:中國標準出版社,2012.
[4] 叢玉隆,馬駿龍.尿液有形成分鏡檢與自動化檢測方法學利弊和互補分析[J].中華檢驗醫(yī)學雜志,2009,32:09-611.
[5] 吳曉華,肖迨,李秋晨,等.全自動尿液分析工作站復檢規(guī)則的制定及應用評價[J].中華檢驗醫(yī)學雜志,2014,37(6):465-468.
[6] 楊曉平,王健,孫燕楊，等.迪瑞H800尿液分析儀及FUS-200全自動尿有形成分分析儀復檢規(guī)則的驗證與結果分析[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2014,32(8):423－424.
[7] 李艷麗.UF1000i尿沉渣分析儀與顯微鏡聯(lián)合檢測尿液有形成分結果比較[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2010,7(8):749.
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