豬場人工授精操作要點及注意事項
一、豬場人工授精定義:
是指用器械采取公豬的精液,經(jīng)過檢查,處理和保存,再用器械將合格的精液輸入到發(fā)情母豬的生殖道內(nèi)以代替自然交配的一種配種方法。
二、豬場人工授精的秘密何在:
大量的實踐證明,要想取得滿意的人工授精結(jié)果,其實很簡單,就是:認真—認真—再認真。
三、人工授精的優(yōu)勢何在:
1、降低生產(chǎn)成本
2、便于生產(chǎn)與管理
3、減少疾病傳播風險
4、最大程度利用優(yōu)良公豬性狀(包括提高公豬利用率和減少公豬飼養(yǎng)數(shù)量)
5、有利于優(yōu)良品種及優(yōu)良父系的推廣
6、有利于克服公、母豬因體形等性狀懸殊過大,不利于本交的困難
7、可提高配種成績
8、能夠遠程運輸
9、能夠在使用前檢查精子的質(zhì)量,提高配種率等等。
四、人工授精操作成功的關(guān)鍵因素:
1、選擇有耐心、細心、責任心的配種員;
2、不斷對結(jié)果(配種率、分娩率、產(chǎn)仔數(shù)、畸形率等)進行分析,以便提高生產(chǎn)成績;
3、 選擇實踐經(jīng)驗豐富的行家(注意:不是專家)對員工進行培訓(xùn);
4、 素質(zhì)高(耐心、細心和責任心,而不一定是文化水平高)的配種員(實踐證明甚至是剛畢業(yè)未養(yǎng)過豬的中專生都可)搞人工受精可以一步到位,不必逐漸過渡(特別是新豬場);
5、 正確認真的操作人工授精過程中每一步(采精、檢查、稀釋、包裝、冷卻、貯存、輸精等)非常重要,這是人工授精結(jié)果理想滿意的前提。
五、人工授精的要點和難點:
1、精液的采集、處理、貯存的操作三要領(lǐng)(基礎(chǔ));
2、發(fā)情鑒定工作非常重要,最好的方法就是對母豬進行(2次/天)試情,一定要牽著公豬(性欲、性情、年齡等);
3、 母豬發(fā)情后何時輸精?(后備、經(jīng)產(chǎn)、斷配間距等);
4、 輸精動作要點:輕插、適深、慢注、輕拔。
六、豬場如何從本交向人工授精操作過渡:
1、如果豬場初次進行人工授精或配種員經(jīng)驗不足,擔心將來生產(chǎn)成績不理想,那么最好先搞1+2=NN+AI+AI,即第一次本交,第二、三次人工授精;其理由是:配種員經(jīng)驗不足,發(fā)情檢定不準,掌握不好第一次配種(或輸精)的最佳時間,而本交會解決這個問題;但是如果在專業(yè)人工授精行家的指導(dǎo)下(采用傻瓜式查情方式、傻瓜式配種方式等),人工授精可一次性完成(不需要過渡),尤其是新建豬場,可一次性到位全部采用人工授精。
2、 也可采取NN+AI+NN,第一次和第三次采用本交,可在發(fā)情早期和晚期刺激母豬接受配種(尤其是后備母豬和斷奶后遲發(fā)情的經(jīng)產(chǎn)母豬),本交有利于排卵同步化及精子在母體內(nèi)的運動;在兩次本交期間采用人工受精可使公豬得到充分休息(公豬數(shù)量緊張時);此法有利于提高配種率和產(chǎn)仔數(shù)。
七、豬場人工授精實驗室工作程序:
1、程序一:
打開電源(預(yù)熱)—搖勻貯精—(檢查貯精質(zhì)量)—配制稀釋液和預(yù)熱—采精前準備—采精—原精處理(活力、密度等)—稀釋—包裝—冷卻—貯存
2、程序二:
打開電源(預(yù)熱)—搖勻貯精—(檢查貯精質(zhì)量)—配制稀釋液和預(yù)熱—采精前準備—采精—等量稀釋—(等價)原精處理(活力、密度等)--再稀釋—包裝—冷卻—貯存
八、打開實驗室里需要預(yù)熱的電器:
1、空調(diào)(21—23℃);
2、顯微鏡;
3、恒溫載物臺:并同時預(yù)熱載玻片、蓋玻片(37 ℃ )(載玻片、蓋玻片可在干燥恒溫箱或自制預(yù)熱箱中預(yù)熱);
4、精子密度分光光度儀(精子密度光電比色計);
5、電子稱(0.5g—2kg);
6、恒溫磁力攪拌器;
7、恒溫水浴鍋(36℃):實際可操作在(37—38℃)或(38—39 ℃)(注意冬夏季節(jié)區(qū)別以及操作順序不同而引起的差別);
8、干燥恒溫箱(38—39℃)或自制預(yù)熱箱(飛利浦保溫燈);
9、預(yù)熱櫥(內(nèi)置一個干濕溫度計)(也就是“傳遞窗”)(長寬高=30×40×40cm)(內(nèi)懸掛100瓦燈泡或菲利譜乳豬保溫燈皆可)。九、搖勻恒溫冰箱中儲藏的精液:
1、輕柔轉(zhuǎn)動或搖動貯存在恒溫冰箱中的精液瓶或精液袋,使之懸浮均勻(2次/天=早晚),防止營養(yǎng)物質(zhì)發(fā)生沉淀,而影響精子的保存期;
2、 清點并記錄貯存在恒溫冰箱中的精液種類和數(shù)目;
3、 同時檢查貯存精液的恒溫冰箱是否處于17 ℃或18 ℃或17—18℃恒溫狀態(tài)下。
十、檢查儲存在恒溫冰箱中的精液的質(zhì)量:
1、將待檢精液滴于預(yù)熱過(37℃或37--38 ℃ )的載玻片上,蓋上預(yù)熱過(37℃或37--38 ℃ )的蓋玻片,置于預(yù)熱過(37℃或37--38 ℃ )的載物臺上,1—3min后即可觀察;
2、 在400×顯微鏡下(目鏡10 × ,物鏡40 × )(也可用100 × )評估貯精質(zhì)量,要求:活力≥60%;形態(tài)異常率≤15%(不能超過20%);死精率≤20%,并作記錄;
3、此步檢查可省,可在貯存的精液使用時/前檢查。
十一、配制稀釋液的順序:
1、 根據(jù)配種員自身經(jīng)驗、本周配種計劃、昨天的配種情況、今天的推測、公豬使用記錄等來決定稀釋液的配制計劃(估計蒸餾水或稀釋液的用量);
2、 根據(jù)個人操作習慣,有兩種操作順序可供選擇:
A:稱量蒸餾水—預(yù)熱(水浴鍋) —稀釋—攪拌(用手搖晃或用恒溫磁力攪拌器)--預(yù)熱(水浴鍋)
B:稱量蒸餾水—稀釋—攪拌(用手搖晃或用恒溫磁力攪拌器)--預(yù)熱
3、 使用恒溫磁力攪拌器攪拌配制的稀釋液時,把轉(zhuǎn)速調(diào)到5—7級攪拌10—15分鐘即可。
十二、配制稀釋液時應(yīng)注意的事項:
1、稀釋液應(yīng)在配制好0.5—24h之間使用(30min前不可用,最好60min后使用,超過24h丟棄);
2、配制好的稀釋液未用完要存于2—8℃的冰箱中;
3、稀釋劑要用干凈的雙蒸餾水稀釋;
4、稀釋液要完全淹沒在恒溫水浴鍋內(nèi)的水中,并蓋住水浴鍋蓋子,水浴鍋控制的溫度應(yīng)在36℃或37—38℃或38--39 ℃ (注意冬夏季節(jié)的差別以及操作順序不同而引起的差別);
5、雙蒸餾水夏季可保存15天,冬天可保存30天,超期不要用;
6、制得的雙蒸餾水盛放在干凈的大玻璃水瓶或盛礦泉水的大塑料瓶內(nèi)以作備用;
7、稀釋劑與雙蒸餾水配制比例是固定的,不可任意改變,若稀釋劑較多,即稀釋液濃度變大,那么稀釋后的精液中的精子內(nèi)外滲透壓不等,會使精子向外滲水,導(dǎo)致活力降低甚至死亡;反之,向精子內(nèi)滲水,同樣精子活力降低甚至死亡。一般情況下,一袋稀釋劑:蒸餾水==1:1(50g:1000ml)或一袋稀釋劑:蒸餾水==1:1(25g:500ml),注意卡蘇公司的稀釋劑(47g/袋:1000ml水);
8、為防止微生物污染或為了殺死精液中被污染的微生物,可在稀釋液中加入抗菌素,如“雙抗”(1000ml稀釋液中可加入青霉素40萬IU,鏈霉素20萬IU);
9、一旦稀釋液中加入了抗菌素,此稀釋液放置不要超過24h;
10、抗菌素水平下降很快,當天使用須重新加抗菌素(主要針對往日存放的稀釋液);
11、在稀釋液中可以添加催產(chǎn)素,有助于提高母豬受胎率和產(chǎn)仔數(shù)(5IU催產(chǎn)素:1000ml稀釋液);
12、特殊情況下:新鮮精液現(xiàn)采現(xiàn)用(不能貯用),可用(經(jīng)過恒溫水浴鍋預(yù)熱過的)等滲的GS液(5%)或等滲的GS(5%)鹽(0.9%)水。
十三、定期清洗雙蒸餾水器:
為了提高從雙蒸餾水器出來的蒸餾水質(zhì)量、制取蒸餾水的速度、蒸餾水器的安全與壽命等,建議定期對雙蒸餾水器進行清洗。每次清洗使用98%鹽酸10ml或使用36%鹽酸量大一些。
十四、精液稀釋劑的種類:
1、稀釋劑分三類:
短效稀釋劑:一般呈弱堿性,保存1—3天
中效稀釋劑:一般呈中性,保存3—5天
長效稀釋劑:一般呈弱酸性,保存5—8天
2、稀釋劑原理:
弱酸性環(huán)境抑制精子活動,弱堿性環(huán)境促進精子活動,所以稀釋液要求弱酸性才能抑制精子活動,延長精子壽命(一般稀釋劑中常加有酸性物質(zhì)如檸檬酸等);
3、正常精液的pH一般為6.8—7.8,呈中性或弱堿性。
十五、市場上常見的稀釋劑:
1、法國卡蘇公司(IMV)稀釋劑
質(zhì)量最好,但溶解性很差(需磁力攪拌器攪拌或用玻璃棒人工攪拌,也可簡單用手不斷搖晃),保存精液可達3—5天;
2、丹麥授權(quán)臺灣生產(chǎn)的稀釋劑
質(zhì)量可以,但溶解性很好,不需攪拌即可溶解,保存精液可達1—3天,在生產(chǎn)實際操作方面,為了保證生產(chǎn)成績,一般超過2天不再使用;
3、其它國內(nèi)外生產(chǎn)的稀釋劑等。
十六、保存稀釋劑應(yīng)注意的事項:
1、稀釋劑平時要放在低溫冰箱中(2—8℃);
2、配制前提前放到室溫(實驗室)使其升溫到室溫(20—25℃);
3、尤其是夏季炎熱高溫,一定要注意稀釋劑的存放。
十七、采精前的準備工作:
1、采精杯(有專售或用喝水的保溫杯)提前準備好預(yù)熱(用干燥恒溫箱或自制預(yù)熱箱進行預(yù)熱),最好同時制備兩個采精杯備用;
2、采精杯的制備:先在保溫杯內(nèi)襯一個一次性采精袋,再在杯口覆四層脫脂紗布或兩層濾紙,用橡皮筋固定在杯邊緣上,要松緊合適,使其能沉入2cm左右,制好后放在38--39℃恒溫干燥箱或自制預(yù)熱箱里進行采精前預(yù)熱;
3、運輸保溫箱(可插電源進行預(yù)熱的運輸保溫箱或自帶蓄電池的恒溫保溫箱)或泡沫保溫箱(良好的保溫性,壁厚至少2cm)打開蓋放在空調(diào)底下預(yù)熱(若條件允許,每天下班之前把保溫箱放在空調(diào)開著的實驗室內(nèi)進行提前3—5h的預(yù)熱);
4、各種塑料杯(3L)、玻璃杯及采精杯(1L)等的重量(包括帶的塑料袋)(用標簽貼到杯上,以后可以定期復(fù)稱);
5、用于在精液稀釋時盛裝稀釋液或精液的塑料杯或玻璃杯提前預(yù)熱(在干燥恒溫箱或自制預(yù)熱箱內(nèi))。
十八、采精操作過程:
1、將預(yù)熱好的采精杯從恒溫干燥箱中或自制預(yù)熱箱中取出,放到提前預(yù)熱過的預(yù)熱櫥(懸掛100瓦燈泡或160瓦乳豬保溫燈)中備用;
2、在采精之前先剪去公豬包皮上的被毛(可?。乐垢蓴_采精及細菌污染;
3、將待采精公豬趕至采精欄,用0.1%KMnO4溶液清洗其腹部及包皮,再用清水洗凈,用干凈毛巾擦干;
4、擠出包皮積尿,按摩公豬的包皮部刺激并引導(dǎo)公豬,待公豬爬上假臺豬后,用溫暖清潔的手(有無手套皆可)握緊伸出的龜頭,順公豬前沖時將陰莖的“S”狀彎曲拉直,握緊陰莖螺旋部的第一和第二褶,在公豬前沖時允許陰莖自然伸展,不能強拉。充分伸展后,陰莖將停止推進,達到強直、“鎖定”狀態(tài),開始射精。射精過程中不要松手,否則壓力減輕將導(dǎo)致射精中斷;
5、收集濃份(經(jīng)驗不足稀稠全收集)精液,直至公豬射精完畢時才放手,注意在收集精液過程中防止包皮部液體等進入采精杯[伸拉陰莖呈一定的彎曲度(近似水平方向)];
6、采集完精液后,迅速將盛裝原精液的采精杯迅速放入預(yù)熱櫥內(nèi),交給實驗室內(nèi)人迅速處理原精(若條件不具備,也可迅速放入恒溫水浴鍋內(nèi)或恒溫干燥箱內(nèi)待檢;若有杯蓋更好,去掉紗布或濾紙,迅速蓋上蓋子);
7、若人手不夠,下班之前或精液采完稀釋后再徹底沖清采精欄(若人手足夠,應(yīng)及時清洗采精欄,否則干燥后的精液膠體很難去除);
8、采精頻率:成年公豬每周1--2次,青年公豬每周1次(1歲前),最好能固定每頭公豬的采精頻率和采精習慣(間隔一定天數(shù)或固定周“號”)。
十九、采精過程中應(yīng)該注意的事項:
1、采精過程中,公豬停止射精時,不要輕易停止采精即松手,因公豬在整個射精過程中一般會有2—3次等間歇(停止射精);
2、間歇時要不斷刺激陰莖龜頭或四指不斷松緊刺激陰莖;
3、在采精過程中不要碰陰莖體,否則陰莖將迅速縮回;
4、采精結(jié)束之后,不要急于去掉紗布或濾紙,尤其是冬季(進入實驗室后再摘掉;若有杯蓋,可以去掉);
5、采精過程中,整個陰莖要偏離公豬身體的方向,以免采精過程中尿液或污物污染。
二十、傳遞窗的規(guī)格和作用:
1、一般豬場在設(shè)計人工授精實驗室與采精室(或采精欄)時是相鄰的,設(shè)計合適的實驗室與采精室之間必定存在傳遞窗;
2、傳遞窗類似“壁櫥”樣式,合格的傳遞窗不僅具有傳遞采精杯的作用,還具有保溫預(yù)熱采精杯的作用。一般豬場老板在管理方面會在工授精實驗室和公豬舍安排一個人,這樣預(yù)熱櫥就顯得重要了,否則影響采精前采精杯的保溫和采精后精液的保溫;如果安排兩個人,預(yù)熱櫥就可省略;
3、傳遞窗大小一般設(shè)計規(guī)格為長寬高=30×40×40cm;傳遞窗兩邊設(shè)計有推拉窗(可以左右推拉關(guān)開);傳遞窗下邊沿離地面高100--120cm即可;
4、傳遞窗上面懸掛100瓦燈泡或100瓦菲利譜乳豬保溫燈用于預(yù)熱保溫。
二十一、原精的處理:
去掉罩在采精杯上的濾紙和粘液(膠體和副性腺),注意避免雜物掉入精液中;對采來的精液處理,不同的人有不同的操作處理順序,當然這取決于個人習慣、操作熟練程度、對公豬精液歷史的了解等因素來決定。
1、先檢測后稀釋:
A、插入干凈的溫度計測量原精液溫度并作記錄;
B、用100×顯微鏡鏡檢精子活力(也可用400 × ),活力低于3分棄之;
C、用分光光度計檢測精子密度,對照密度轉(zhuǎn)換表記錄對應(yīng)的密度值;
D、用電子稱稱量原精重量==原精體積,并作記錄;
E、計算需要稀釋的頭份和所需的稀釋液;
2、先稀釋后檢測(對公豬精液了解的條件下)
A、稱量原精重量==原精體積,并作記錄;
B、先對原精等量稀釋,以后當作原精對待按上述“先檢測后稀釋”步驟進行操作。
二十二、精液處理應(yīng)該注意的事項:
1、記錄精液情況(體積、密度、活力等);
2、根據(jù)平時對每頭公豬的了解,可以決定對其所采的精液處理順序如精液稀釋、活力測定、密度測定等順序;
3、稀釋時用玻璃棒導(dǎo)流;
4、稀釋過程中精液攪拌(速度、方向等)(整個過程中最好進行2次攪拌);
5、稀釋后精液應(yīng)有一段緩沖時間(讓精子與稀釋液充分相互滲透均勻),不要急于分裝(稀釋后放置10min左右再分裝);
6、分裝后的精液要橫躺在有毛巾鋪的桌上,緩慢冷卻1—2h(否則用幾層干燥毛巾包裹著放進恒溫箱內(nèi)),不要急于放到恒溫冰箱內(nèi);7、稀釋后的精液盡量減少與空氣的接觸量(輸精瓶捏扁后蓋上蓋子);
8、稀釋時將預(yù)熱過的稀釋液盛放入預(yù)熱過的合適的塑料杯或玻璃杯內(nèi),然后右手端著盛著稀釋液的塑料杯或玻璃杯,左手拿著玻璃棒用于導(dǎo)流,玻璃棒下部接觸著杯壁,接著緩慢將稀釋液沿著杯壁倒入精液中(稀釋過程中最好停頓2次對所稀釋的精液進行攪拌);9、一定要控制稀釋液與精液的溫差,最好在1℃之內(nèi),但要注意:只可調(diào)整稀釋液溫度,任何情況下都不得調(diào)整精液溫度,將調(diào)溫后的稀釋液沿杯壁緩慢注入原精液中;
10、稀釋前中后盡量減少精液的轉(zhuǎn)移和震動;
11、稀釋后的精液密度不能過大,否則稀釋劑中的營養(yǎng)物質(zhì)不能提供眾多精子的需要,也就是說精液不能保存時間過長,即精液保存不能達到稀釋劑規(guī)定的天數(shù);
12、精液包裝一般在30—40億精子/頭份(至少20億精子/頭份;至多45億精子/頭份);輸精體積一般在80—100ml/頭份,至少70ml/頭份。
二十三、原精活力的評估(5分制):
0分:視野中無精子或精子全部死亡;
1分:無直線運動,包括只做頭部或尾部運動及原地轉(zhuǎn)動的精子;
2分:運動速度緩慢,軌跡不規(guī)則,或僅做轉(zhuǎn)圈運動;
3分:不明顯的直線運動軌跡,運動速度緩慢,精子粘在一起;
4分:呈明顯的直線運動軌跡,運動速度較快,有少部分精子粘在一起;
5分:尾部呈鞭狀快速擺動,呈明顯的直線運動軌跡;
以上評估方法僅是經(jīng)驗的簡單描述,最主要的是要求操作人員要有一定的人工授精操作經(jīng)驗,否則沒有以前的經(jīng)驗參照,可能會造成判斷不準;眼觀判斷以后,要求精子活力達到3分(包括3分)以上才可稀釋處理包裝使用。
二十四、根據(jù)精液色澤來估計原精液的密度:
1、若呈水樣,說明含精子很少(<1億/ml);
2、若呈乳白色,說明濃度正常,含精子2—4億/ml;
3、若呈深乳白色,說明濃度很濃,可達4—6億/ml,此精液呈云霧狀;
4、若呈粉紅色至紅色,說明精液中含血,應(yīng)棄之,讓公豬休息3—6W后,可試著采精(料中多加些礦物質(zhì)、多維等進行治療);
5、若呈黃色至綠色,說明精液中混有包皮液(尿液和細菌等),應(yīng)棄之;
6、若呈淡綠色,說明精液中可能混有膿液,精液應(yīng)棄之。讓公豬休息2—3周后,可試著采精(料中添加長效廣譜抗生素治療和多加些電解多維保健促愈);
7、精液中不能有毛發(fā)、塵土或其他污染物(宏觀),若顯微鏡下發(fā)現(xiàn)精液中有凝固和成塊物質(zhì)(微觀),并且精子凝聚其上,說明公豬生殖系統(tǒng)可能有炎癥,精液應(yīng)棄之。
二十五、精液的精子密度測定方法:
1、血細胞計數(shù)法:較準確、成本低、但費工費時、效率低,不切實際;
2、分光光度計:準確、快速、方便、但成本高;
分光光度計原理:用精子對光通透力差為依據(jù);光度計確定精子密度,其結(jié)果比實際值偏高,因該方法將精液中的細胞碎屑等非精子都視為精子計算了,誤差為5—8%;
3、顯微鏡估測法:準確性差但要求員工經(jīng)驗性強(主觀經(jīng)驗)
根據(jù)顯微鏡觀察精液密度大小,來量取稀釋液稀釋;先小量稀釋,稀釋后再用顯微鏡觀察其密度大小,若密度還大,再酌情稀釋,根據(jù)自身經(jīng)驗直到滿意為止(若無準確精液密度,稀釋比例一般在1:4—10,至少1:4;不要超過1:10)。
二十六、精液密度顯微鏡估測法:
估測是檢測精液密度常用的一種方法,常與活力檢測同步進行,根據(jù)視野中精子分布情況和稠密來分“密、中、稀”三個等級;經(jīng)驗豐富的工作人員(在無精液密度計條件下)可以采用精液密度顯微鏡估測法。
密:整個視野中布滿精子,相臨精子之間的空隙小于一個精子長度,看不清各個精子的活動,“密”級精液含有精子約6億/ml以上;
中:視野中精子較多,可見各個精子活動,相臨精子之間的間隙在1-2個精子長度間,“中”級精液含有精子約3--4億/ml;。
?。阂曇爸芯雍芟∩伲嗯R精子之間的間隙在2個精子長度以上,“稀”級精液含有精子約2億/ml以下。
二十七、精液稀釋前后應(yīng)該檢測的項目:
1、 原精應(yīng)檢測的項目:
氣味(干凈的精液只有一點氣味或無味,受包皮液污染的精液氣味很大)
2、原精稀釋后應(yīng)檢測的項目:
活力(稀釋后活力、貯存后活力、混合精液的活力)。
二十八、精子畸形率的測定:
1、精液中精子畸形率要求≤15%或18%;
2、用普通顯微鏡測定,需對精子染色(伊紅或姬姆薩)(對所有精子都上色,染色只是為了觀察的清晰);
3、用相差顯微鏡可直接觀察精子的畸形率;
4、對公豬精液中精子畸形率的測定每月一次(對新公豬最初幾次都要進行精子畸形率檢查);
5、尤其夏秋季(夏季高溫對精液的危害長達2個月之久),注意公豬精液的質(zhì)量的保證,定期檢查精液質(zhì)量(每2周一次);
6、取稀釋后的精液一滴于載玻片上,用載玻片沿著一側(cè)慢慢抹成薄薄的一層,然后晾干(自然狀態(tài))或炕干,滴一滴稀釋后的伊紅或姬姆薩(不用抹平)即可觀察(正?;蚧尉尤可仙?,染色只是為了觀察的清晰,通過目鏡整個視野可能就幾十個精子,因為抹成薄薄一層所導(dǎo)致的,這樣做還是為了清晰);
二十九、正常精子的構(gòu)造和功能:
頭部:含有蛋白質(zhì)和遺傳物質(zhì),決定著精子的受精能力
中段:為頭尾的連接樞紐,對精子的運動類型起著調(diào)制性
尾部:對精子的運動類型非常重要(控制/左右精子的運動類型)
三十、畸形精子的種類:
1、頭部畸形的精子:不對稱、尖塔形、錐形、皺縮、小頭、大頭、長頭、雙頭等
2、中段畸形的精子:折彎、腫脹、缺損、螺旋、雙重段等
3、尾部畸形的精子:螺旋、卷尾、雙尾、折彎、無尾等
4、頂體畸形的精子:不完整、膨脹、皺縮等
5、原生質(zhì)滴的精子:攜帶原生質(zhì)滴者
三十一、精子原生質(zhì)滴的解說:
1、原生質(zhì)滴也叫細胞質(zhì)滴,是精子在發(fā)育/生過程中殘余的原生質(zhì);
2、原生質(zhì)滴的出現(xiàn)和消失是判別精子是否成熟的依據(jù),原生質(zhì)滴距精子頭部越遠,精子的受精能力可能就越強;
3、精子帶著原生質(zhì)滴,標志著精子尚未成熟到具有使卵子受精的能力。精子在其頭尾結(jié)合部(中段)帶著一個原生質(zhì)滴進入附睪,精子在附睪內(nèi)成熟期間,該原生質(zhì)滴會向尾部遠端移動,最終在尾部的中段附近脫落;
4、精子成熟后就貯存在附睪內(nèi)直到射精時被射出,若精子若未被射出,就會在附睪內(nèi)被分解吸收(自吸);
5、若成年公豬射精中20%以上的精子含有原生質(zhì)滴,意味著公豬可能使用過度,說明射出的成熟精子快于精子的成熟更新過程;若青年公豬射出的精子含有許多原生質(zhì)滴的精子,說明此公豬還沒有達到性成熟。
三十二、精子頂體的解說:
1、頂體為一囊狀結(jié)構(gòu),在精子的頭部,覆蓋精子頭部80%;頂體在受精過程中有著重要作用;
2、頂體中含有一種酶,其可溶解卵細胞壁,從而進入卵子內(nèi)發(fā)生受精;若頂體遭到破壞,就會抑制精子的獲能和受精。
三十三、精液稀釋的原因:
1、 增大體積以提高其利用率;
2、為精子提供一個有利于保存的環(huán)境;
三十四、精液包裝操作:
1、將稀釋好的精液放置在一定的高度(可以把高度大約為60cm的板凳放在桌子上,而把盛著精液的杯子放置在板凳上);
2、用吸耳球?qū)⑾♂屵^的精液吸入虹吸導(dǎo)管(黃色軟皮管,外直徑約1cm,大約1m即可),并棄掉開始部分精液(虹吸導(dǎo)管一頭放進稀釋過的精液中;另一頭被夾帶一個小木夾子或小鐵夾子,方便控制虹吸導(dǎo)管中的精液流動);
3、當然也可直接倒入輸精瓶內(nèi),若為輸精袋,必須按上述方式[使用輸精袋必須有壓膜機或半自動分裝機(與壓膜機、電源等連為一體)];
4、分裝要緩慢,達到每瓶所需的精液量;
5、在瓶上作好標記(公豬代號、采精日期等)。
三十五、精液冷卻過程中應(yīng)該注意的事項:
1、貯存之前:輸精瓶內(nèi)的精液必須先冷卻到室溫(21—23℃),嚴禁分裝后未冷卻直接放進恒溫冰箱內(nèi)(17℃或18 ℃或17—18℃);
2、冷卻時間:在室溫21—23 ℃條件下大約1—2h;對于經(jīng)驗不足者,可以插入干凈的溫度計實測來控制;嚴禁已冷卻到室溫的精液長時間放置在實驗室桌子上;
3、冷卻場所:人工授精實驗室即21—23℃室溫,放在干燥并干凈的且底下鋪著兩層干燥毛巾的桌子上(桌子可為木桌子或水泥板桌子)。
三十六、精液貯存過程中溫度的重要性:
1、精液貯存要用專用精液貯存恒溫冰箱;
2、精液貯存在17 ℃或18 ℃或17—18℃恒溫狀態(tài)下(此溫度下精子的新陳代謝水平降低,將會消耗較少的營養(yǎng)物質(zhì)及產(chǎn)生較少的廢物,從而延長精子的壽命);
3、嚴禁≤15℃(低于此溫度將會損害精子,因豬的精子比其他動物的精子對于低溫更為敏感);
4、嚴禁≥20℃(高于此溫度會加速精子的新陳代謝水平,導(dǎo)致精子衰竭,縮短精子的壽命);可見,密切注意并控制精液貯存期間的溫度變化對于維持精子的活力和壽命是多么重要!
三十七、恒溫冰箱在保存精液過程中應(yīng)該注意的事項:
1、恒溫冰箱溫度要恒定,每天注意看一下冰箱外在顯示器顯示的溫度和冰箱內(nèi)的溫度計(額外添加,與冰箱外在溫度顯示器相互監(jiān)督對照)顯示的溫度差異情況(最好作一下記錄),建議每天檢查2次(早晚),并在恒溫冰箱貯存表上作下記錄;
2、實驗室人員每天需對恒溫冰箱中的貯精進行盤存(每天早晚兩次,至少一次),并作好盤存記錄表;保證精液先進先出的原則,過期的精液應(yīng)棄掉或做它用;
2、恒溫冰箱內(nèi)要放一些冰快(最好為商業(yè)冰快),以防停電等特殊情況;
3、精液在冰箱內(nèi)要橫躺著,最多不要超過三層;
4、恒溫冰箱內(nèi)貯存的精液應(yīng)每天翻轉(zhuǎn)2次(早晚);
5、冰箱內(nèi)嚴禁存放其它不必要的東西,尤其是食品和肉類等。
三十八、人工授精實驗室需詳細記錄的表格:
1、公豬采精記錄表(個體公豬記錄表)[采精日期、采精員姓名、公豬耳號、采精量、密度、活力、畸形率、備注(公豬健康狀況和性欲等)];
2、公豬采精記錄匯總表(每一天所有公豬采精記錄情況);
3、公豬采精記錄卡(掛在公豬欄/圈上方的鐵絲上);
4、公豬采精分配表[每一頭公豬的采精周期或按公豬間隔一定的天數(shù)采精(如某一頭公豬固定在5、10、15、20、25、30號或3、7、11、15、19、23、27號采精)]。
三十九、精液處理完后實驗室整理:
1、關(guān)閉那些應(yīng)該關(guān)的儀器電源;
2、清理擺放好桌子上的用具和儀器,如顯微鏡不用時用袋子套上以防灰塵等;
3、清洗采精、處理、稀釋、包裝等整個過程中使用過的用具和儀器,再用雙蒸餾水清涮和過濾;
4、把清洗和過濾過的用具和儀器放置在應(yīng)該放的位置;
5、顯微鏡鏡頭(目鏡和物鏡)定期用二甲苯浸泡,以保持清潔(2—4周一次);
6、注意避免用于精液配制的用具與清洗劑的接觸;
7、清理水槽中的廢物、廢液等;
8、清理垃圾斗中的垃圾;
9、清理和打掃實驗室地面的衛(wèi)生,保持干燥等等;
四十、精液運輸箱的選擇:
1、運輸箱選擇的前提:
A、應(yīng)該選擇一個能夠在整個運輸過程中維持精液溫度的運輸箱;
B、運輸箱的選擇要考慮運輸過程中的溫度變化和運輸?shù)臅r間(尤其是夏季和冬季)。
2、運輸箱種類
A、長途運輸箱:泡沫箱;
B、短途運輸箱:精液保溫箱、恒溫保溫箱(帶電池);
四十一、精液包裝運輸應(yīng)該注意的事項(長途外售):
1、包裝材料:
A、泡沫保溫箱:良好的保溫性,壁厚至少2cm,規(guī)格為25×25×15cm(市售);
B、低溫冰袋:長效,溫度變花緩慢(市售);
C、封箱膠帶:寬(5cm左右)而透明的膠帶(市售);
2、包裝前準備:
A、將所需泡沫保溫箱和低溫冰袋放入20℃環(huán)境中(最低不能低于17 ℃ ),不少于5h;
B、需運輸外售的精液置于17—18 ℃恒溫冰箱內(nèi)保存至少3h;
3、精液包裝:
A、無論袋裝或瓶裝精液都需平鋪疊放,袋裝精液,四層放一層冰袋;瓶裝精液,兩層放一層冰袋。(若泡沫箱未裝滿,可用塊狀泡沫壓實,以免運輸顛簸致使精液瓶/袋混亂且精液受到震動);
B、蓋上蓋子,用膠帶將箱體的縫隙密封好;
C、填寫精液信息卡[精液種類、數(shù)量、類型(袋裝或瓶裝)、采精時間、包裝時間、準備人姓名等]并將其貼于箱蓋上,用透明膠帶蓋??;
D、箱蓋子上正規(guī)寫好收貨人的姓名及聯(lián)系電話。
四十二、輸精前準備工作:
1、人工授精前,員工要分工明確(最好形成固定規(guī)律);
2、把輸精的器具帶齊,如輸精管、剪子、潤滑劑、衛(wèi)生紙等,放到一個干凈的紙箱內(nèi)或工具箱內(nèi);
3、精液(往日的精液使用前活力要測定)最好放到已經(jīng)預(yù)熱過的保溫箱內(nèi)(尤其秋冬季)(在冬季可以考慮在保溫箱底部放19—20℃左右的盛暖水的葡萄糖瓶,與精液用適厚毛巾隔離,精液放在上面,并用毛巾蓋?。?;
4、母豬陰戶要用0.1%KMnO4水擦洗,并用衛(wèi)生紙擦干(從里到外),若母豬陰戶較干凈,可直接用衛(wèi)生紙擦凈即可。
四十三、輸精時注意的事項:
1、精液從17或18℃或17--18 ℃冰箱中取出或從精液保溫箱中取出后不需升溫,直接用于輸精;
2、輸精管的選擇:經(jīng)產(chǎn)母豬使用大海綿頭輸精管(經(jīng)產(chǎn)母豬專用),后備母豬使用細尖海綿頭輸精管(后備母豬專用),輸精前需檢查海綿頭是否松動;
3、每兩次輸精之間的時間間隔至少為8--12小時;
4、輸精過程中出現(xiàn)拉尿情況要及時更換一條輸精管,母豬拉糞時不準繼續(xù)再向生殖道內(nèi)推進輸精管;
5、三次輸精后8--12小時仍出現(xiàn)穩(wěn)定發(fā)情的個別母豬可多加一次人工授精;
6、從保溫箱中每拿出一頭份精液后,要馬上蓋嚴保溫箱;
7、不要在輸精前對輸精瓶底部戳孔(尤其是在冬季),這樣不利于特殊情況下的輸精;
8、在冬季給輸精瓶自縫一個“手套”(若配種室溫度適可的條件下,可?。?/span>
9、在春、夏季節(jié)盡量讓母豬把精液自吸進去,在秋、冬季節(jié)盡量給母豬輸精瓶或輸精袋施加一定的衡壓,盡量縮短精液在外界停留的時間;
10、在輸精時盡量讓母豬保持穩(wěn)靜,人要跟著母豬動,一定不能讓母豬跟著人動,這就要求輸精員盡量不要亂動而改換姿勢;
11、在輸精前要盡量排凈輸精管內(nèi)的空氣,以免輸精完后精液倒流;
12、等待輸精的上一頭母豬不要提前與公豬見面,以免到輸精的時候靜立反射不明顯及不利于精液的快速吸收;
13、輸精時最好有公豬的存在(前面或隔欄);
14、輸精最好放在大欄內(nèi)進行,不要在限位欄內(nèi)進行;
15、對每一頭授精母豬的兩次輸精間隔的8—12小時過程,最好隔離開公母豬;
16、涂抹潤滑劑時,注意不要堵塞輸精管孔(特殊情況下可用精液涂抹潤滑);
17、插輸精管時,前15cm左右要與水平面大約呈45度角斜向上插,然后平行插入,鎖在子宮頸皺褶內(nèi);
18、輸精結(jié)束后,讓輸精管停留在陰道內(nèi)大約3—5分鐘左右,不要急于拔下,否則精液易倒流;
19、要輕拔輸精管并斜向下與水平面呈45角,否則容易導(dǎo)致精液倒/回流。
四十四、輸精時選擇輸精管和輸精瓶應(yīng)該注意的事項:
1、輸精瓶最好具有一定的彈性和韌性,不要太柔軟(瓶壁?。?,那樣不利于輸精操作;
2、要注意輸精管海綿頭粘的牢不牢,不牢固的則容易脫落到母豬子宮內(nèi);
3、要注意海綿頭內(nèi)塑料細管的長度,若偏長,則海綿頭堅硬,容易劃傷母豬陰道和子宮頸口黏膜,若偏短,則海綿頭太軟不易插入或以輸精;
4、要注意輸精管細管一定要具有彈性和韌性,不能太堅硬或太柔軟,否則容易損傷陰道及子宮頸口黏膜或打折皺不利于輸精。
四十五、輸精時配種員的姿勢和動作:
1、騎在豬背上(個高),一手拿著輸精瓶或輸精袋,一手刺激母豬的陰戶;
2、腋窩壓在豬背上(個低),腋窩壓在豬背上的手拿著輸精瓶或輸精袋,另一手刺激母豬的陰戶或乳房;
3、一手壓著豬背,一手拿著輸精瓶或輸精袋;
4、替代物(自動輸精背帶),操作麻煩,不太方便操作,絕大多數(shù)豬場不用。
四十六、母豬的最優(yōu)配種程序:
1、最優(yōu)的配種程序(檢查發(fā)情2次/天)
(公豬刺激時)站立發(fā)情
第1次配種
第2次配種
第1天下午
第2天下午
第1天下午
第2天早上
第3天早上
提示: 發(fā)現(xiàn)站立發(fā)情,推遲8--12h配種;配種之間間隔24h
(公豬刺激時)站立發(fā)情 第1次配種 第2次配種第3次配種
B、經(jīng)產(chǎn)母豬 第1天早上 第1天下午 第2天上午第2天下午
第1天下午
第2天早上第2天下午
第3天早上
提示: 發(fā)現(xiàn)站立發(fā)情,推遲8--12h配種;配種之間間隔8—12h
(公豬刺激時)站立發(fā)情
第1次配種
第2次配種
C、后備母豬
第1天早上
第1天下午
第2天早上
第1天下午
第2天早上
第2天下午
提示: 發(fā)現(xiàn)站立發(fā)情,推遲8--12h配種;配種之間間隔8--12h
(公豬刺激時)站立發(fā)情 第1次配種 第2次配種第3次配種
D、后備母豬 第1天早上第1天下午 第2天早上第2天下午
第1天下午第2天早上 第2天下午第3天早上
提示: 發(fā)現(xiàn)站立發(fā)情,推遲8--12h配種;配種之間間隔8--12h
2、最優(yōu)的配種程序(檢查發(fā)情1次/天):
(公豬刺激時)站力發(fā)情
第1次配種
第2次配種
A、經(jīng)產(chǎn)母豬
第1天早上
第1天早上
第2天早上
第1天下午
第1天下午
第2天下午
提示: 發(fā)現(xiàn)站立發(fā)情,立即配種;配種之間間隔24h
(公豬刺激時)站力發(fā)情 第1次配種 第2次配種第3次配種
B、經(jīng)產(chǎn)母豬 第1天早上 第1天早上 第2天早上第3天早上
第1天下午
第1天下午 第2天下午 第3天下午
提示: 發(fā)現(xiàn)站立發(fā)情,立即配種; 配種之間間隔24h
(公豬刺激時)站力發(fā)情
第1次配種
第2次配種
C、后備母豬
第1天早上
第1天早上
第1天下午
第1天下午
第1天下午
第2天早上
提示: 發(fā)現(xiàn)站立發(fā)情,立即配種;配種之間間隔8—12h
(公豬刺激時)站力發(fā)情 第1次配種 第2次配種第3次配種
D、后備母豬第1天早上 第1天早上 第1天下午第2天早上
第1天下午 第1天下午
第2天早上 第2天下午
提示: 發(fā)現(xiàn)站立發(fā)情,立即配種;配種之間間隔8—12h
3、傻瓜式配種程序(檢查發(fā)情2次/天):
(公豬刺激時)站力發(fā)情第1次配種 第2次配種 第3次配種
A、經(jīng)產(chǎn)母豬 第1天早上 第1天早上 第1天下午第2天早上
第1天下午
第1天下午 第2天早上 第2天下午
提示: 發(fā)現(xiàn)站立發(fā)情,立即配種;配種之間間隔8--12h
B、后備母豬 第1天早上 第1天早上 第1天下午第2天早上
第1天下午
第1天下午 第2天早上 第2天下午
提示: 發(fā)現(xiàn)站立發(fā)情,立即配種;配種之間間隔8—12h
此傻瓜式配種程序最適用、最簡單,尤其是配種員在
發(fā)情檢查、授精方面等經(jīng)驗不足(規(guī)?;i場廣泛使用)。
四十七、配種次序原則(每天的發(fā)情母豬的配種先后順序):
最先:斷奶的發(fā)情母豬
其次:重復(fù)配種
再次:返情母豬
最后:后備母豬
總之,原則不變。配種次序可根據(jù)個人習慣和配種程序等靈活掌握,最終以分娩率和產(chǎn)仔數(shù)為準繩。
四十八、公豬精液的三級劃分(等級):
一級公豬精液:公豬性欲強,精液質(zhì)量優(yōu)(用于發(fā)情母豬的第一次配種);
二級公豬精液:公豬性欲較強,精液質(zhì)量良(用于發(fā)情母豬的第二次配種);
三級公豬精液:公豬性欲一般,精液質(zhì)量一般(用于發(fā)情母豬的第三次配種);
四十九、采精欄設(shè)計應(yīng)該注意的事項:
1、 從“減少污染”原則來設(shè)計;
2、考慮“員工的安全”原則來設(shè)計;
3、采精欄設(shè)計大小至少為長寬==230×210cm;
4、安全柱的設(shè)計(高110—120cm,安全柱外直徑8--10cm左右粗鋼管或水泥柱,柱間間寬25—30cm);
5、安全柱應(yīng)距采精室的墻壁或欄桿至少50cm(一般為60—90cm之間);
6、利于方便沖洗,無任何障礙物;
7、地面不滑(可用防滑漏縫橡膠墊代替)。
五十、采精欄內(nèi)假母豬臺的位置:
1、假母豬臺在采精欄里的位置要根據(jù)安全柱有無來定;
2、在有安全柱條件下,假母豬臺要固定在近似采精欄中間,這樣有助于保證采精人的安全;
3、在無安全柱條件下(四周圍墻或漏縫鐵柵欄),假母豬臺要固定在采精欄的一角(采精人可以在拐角來回走動,但公豬不能),這
助于保證采精人的安全。
五十一、假母豬臺的設(shè)計:
1、 可以購買“商品化假母豬臺”;
2、可以自制假母豬臺;(設(shè)計簡圖略)
A、長度大約80—100cm;
B、高度大約為45—55cm(實際高度根據(jù)公豬身高、體況來調(diào));
C、寬度為30—35cm;
D、假母豬臺上鋪一層“泡沫橡膠+布麻袋”,厚度約5cm左右(也可用“泡沫橡膠+豬皮”);
E、公豬腳扶手要覆蓋橡膠或布麻袋,以防損傷公豬肢蹄。
五十二、公豬欄設(shè)計應(yīng)該注意事項:
1、公豬限位欄(可以不存在,全為大圈欄):
A、若公豬小于1歲,則限位欄設(shè)計大小為長寬==(230—240cm)×65cm;
B、 若公豬大于1歲,則限位欄設(shè)計大小為長寬==(230—240cm)×75cm;
2、公豬圈欄(可以不存在,全為限位欄):
圈欄大小為長寬高== 320cm×250cm×120cm;
3、若限位欄和圈欄同時存在,最好把限位欄和圈欄設(shè)計分布在中央走道(喂料道)的兩邊(一邊為限位欄,一邊為圈欄);
4、公豬圈欄的設(shè)計主要考慮兩點:
病豬治療期間使用(便于治療和休息);
利于定期讓公豬運動(增強健康和強健肢蹄);
5、設(shè)計合理的豬場一般在公豬舍緊鄰的外邊設(shè)計有一個橢圓形的公豬運動走道(橢圓形走道長度一般在100—200m內(nèi),走道寬度約為
cm,走道墻高約為100—120cm)。
五十三、人工授精實驗室(精液處理室)布局:
1、布局人工授精實驗室原則:
A、大型的商業(yè)化人工授精站實驗室或豬場內(nèi)部小型的人工授精實驗室,都要按最高的衛(wèi)生標準來維護和使用人工授精實驗室及其各種備和儀器;
B、實驗室內(nèi)原則要求布局基本合理(干區(qū)域、分裝區(qū)域、濕區(qū)域);
C、各儀器局部布局以操作員操作方便為準繩;
2、實驗室劃分三大區(qū)域:
干區(qū)域:顯微鏡、恒溫載物臺、精子密度計等;
濕區(qū)域:恒溫水浴鍋、電子稱、磁力攪拌器、雙蒸餾水器、連接著水管/水池等;
分裝區(qū)域:裝瓶、分裝機、冷卻、包裝等;
3、實驗室面積:
A、高檔次大型人工授精站實驗室長寬=680×480cm足以,實驗室當中內(nèi)置(可移動)一張大木桌子,其長寬高40cm×120cm×80cm,主要用于冷卻精液和外售精液包裝等使用;
B、實用性人工授精站實驗室長寬=400cm×400cm或530cm×300cm即可;
C、豬場內(nèi)小型人工授精實驗室:長寬=350×250cm即可4、人工授精站和豬場內(nèi)人工授精實驗室設(shè)計與布局圖(略)。