胃癌患者胃粘膜活檢不同病變組織中EGFR的表達(dá)

　　胃癌是人類最常見的惡性腫瘤之一，位居癌癥死因的第二位。隨著內(nèi)鏡技術(shù)的發(fā)展，胃粘膜活檢在胃粘膜疾病的確診和胃癌的早期診斷中發(fā)揮著越來越重要的作用。表皮生長因子受體(EGFR)家族屬于酪氨酸激酶受體家族，在許多腫瘤中過表達(dá)，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞生長失控和惡性程度增加。為觀察 EGFR在胃粘膜活檢病變組織中的表達(dá)意義，探討 EGFR 在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用，及對胃粘膜活檢組織的診斷意義，本研究檢測了胃粘膜活檢不同病變組織中 EGFR 的表達(dá)。

　　1 材料與方法

　　1． 1 對象:選取胃鏡活檢組織，包括 10 例正常胃粘膜上皮、16例胃上皮瘤樣病變(7 例胃底腺息肉、9 例增生性息肉)、19 例胃上皮內(nèi)瘤(低高級別上皮內(nèi)瘤變分別為 13 例、7 例)及 47 例胃腺癌組織。胃癌組男 28 例，女 19 例;小于 50 歲 13 例，50 歲以上 34 例;高、中分化 15 例，低分化 32 例。所有病例均經(jīng)病理診斷證實，為初次活檢診斷病例，所有病例均未做過放化療。

　　1． 2 檢測方法:鼠抗人 EGFR 單克隆抗體，即用型免疫組化試劑盒，購自廣州深達(dá)生物技術(shù)有限公司。所有標(biāo)本均經(jīng) 10% 中性福爾馬林溶液及時固定。采用免疫組化 iVision 二步法，具體操作按說明書進(jìn)行。DAB 顯色，蘇木素復(fù)染，脫水封片。以PBS 代替一抗作為陰性對照，以已知陽性切片作為陽性對照。

　　1． 3 結(jié)果判定:光學(xué)顯微鏡下觀察:以細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒視為 EGFR 的陽性著色。染色結(jié)果以表達(dá)陽性率的形式表示。選取細(xì)胞分布均勻的視野，計數(shù)每個高倍視野中陽性細(xì)胞數(shù)與細(xì)胞總數(shù)，每例計數(shù) 3 個高倍視野，計算其中平均陽性細(xì)胞數(shù)，以百分?jǐn)?shù)表示。即表達(dá)陽性率 = (陽性細(xì)胞數(shù)/細(xì)胞總數(shù)) ×100%。

　　1． 4 統(tǒng)計學(xué)處理:應(yīng)用 SPSS13． 0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，率的比較采用方差分析，P ＜0． 05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

　　2 結(jié) 果

　　2． 1 EGFR 在胃粘膜組織中的表達(dá):在正常胃粘膜上皮、上皮瘤樣病變、上皮內(nèi)瘤及腺癌組織中，EGFR 的表達(dá)陽性率分別為6． 56 ± 2． 21% 、10． 25 ± 3． 59% 、36． 37 ± 4． 80% 、70． 47 ± 7．78%，在胃上皮內(nèi)瘤及腺癌組顯著高于正常胃粘膜上皮及上皮瘤樣病變組(P ＜0． 05，P ＜0． 01)，腺癌組顯著高于上皮內(nèi)瘤組(P ＜0． 05)，在正常胃粘膜上皮、上皮瘤樣病變組中，差異無顯著性(P ＞0． 05)。EGFR 的表達(dá)陽性率見表 1?！颈?】

　　EGFR 由 1186 個氨基酸殘基構(gòu)成，是一種分子量為 170kDa的跨膜受體糖蛋白，屬于 I 型生長因子受體家族成員，目前已確定其基因定位于染色體 7p12。EGFR 具有酪氨酸激酶活性，與其配體如 EGF、TGF － α 等結(jié)合后，可以激活位于細(xì)胞內(nèi)的激酶通路，包括 Y992，Y1045，Y1068，Y1148 and Y1173 等激活位點，引起下游信號傳導(dǎo)的增強(qiáng)，導(dǎo)致細(xì)胞生存和遷徙相關(guān)的基因，c － Myc，cyclin － D，MMP －2 和 matrilysin 的表達(dá)增加，進(jìn)一步發(fā)揮生理效應(yīng)，對維持細(xì)胞分化、增殖等起著關(guān)鍵作用。

　　一組針對 HP 感染兒童的研究中，EGFR 在胃竇粘膜表層上皮細(xì)胞表達(dá)顯著增加，在腺細(xì)胞表達(dá)顯著減少，兩者差異顯著，提示 EGFR 在胃竇粘膜上皮細(xì)胞再生中可能發(fā)揮著重要作用。

　　研究顯示，EGFR 在多種腫瘤中過表達(dá)，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖，并抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡，在腫瘤細(xì)胞生長、侵襲、血管生成、轉(zhuǎn)移、播散中起到重要作用。目前，已被應(yīng)用于多種腫瘤生物治療的靶向治療研究。有研究顯示，EGFR 在胃上皮異型增生組織中的表達(dá)顯著高于正常粘膜組織。EGFR 在胃癌組織表達(dá)明顯高于癌旁正常粘膜，并與侵犯深度、臨床分期有關(guān)。EGFR 在胃腺癌組織及細(xì)胞中表達(dá)顯著高于癌旁正常組織及正常胃上皮細(xì)胞，并能促進(jìn)淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移。

　　本研究顯示，在正常胃粘膜上皮、上皮瘤樣病變、上皮內(nèi)瘤及腺癌組織中，EGFR 的表達(dá)陽性率分別為 6． 56 ± 2． 21%、10．25 ± 3． 59% 、36． 37 ± 4． 80% 、70． 47 ± 7． 78%，在胃上皮內(nèi)瘤及腺癌組顯著高于正常胃粘膜上皮及上皮瘤樣病變組(P ＜0． 05，P ＜ 0． 01) ，與上述研究結(jié)果相近。表明隨著胃粘膜上皮的增生活躍，EGFR 的表達(dá)逐漸增強(qiáng)，在胃癌組織中表達(dá)最強(qiáng)，提示其在胃癌的發(fā)生發(fā)展中可能起到重要作用。EGFR 在腺癌組的表達(dá)顯著高于上皮內(nèi)瘤組(P ＜ 0． 05)，提示 EGFR 在胃癌中的功能增強(qiáng)，發(fā)揮了更強(qiáng)的促進(jìn)增殖，抑制凋亡、促進(jìn)腫瘤形成的作用，可能對于良惡性病變的鑒別也有一定意義。在正常胃粘膜上皮、上皮瘤樣病變組中，差異無顯著性，提示 EGFR 在非瘤組織中也發(fā)揮著生理功能，上皮瘤樣病變具有較低的增殖活性，這也與其臨床行為相一致。

　　本研究結(jié)果顯示，EGFR 的表達(dá)與胃癌患者年齡、性別、分化程度等因素?zé)o關(guān)，可能與本組病例數(shù)相對較少有關(guān)，尚待進(jìn)一步研究。